ACTIVITATEA FAGOCITARA "IN VITRO" LA IEPURI

ACTIVITATEA FAGOCITARA "IN VITRO" LA IEPURI

Iepurii reprezinta o specie de interes economic deosebit in ultimul timp, atat pentru productia de carne cat si pentru cea de blanita. Influenta factorilor stresanti asupra acestor animale este deosebit de intensa avand repercursiuni negative asupra sta­rii de sanatate datorita depresiei imunologice. De aceea este impor­tanta cunoasterea posibilitatilor de caracterizare a profilului imunologic ca si a valorilor normale ale parametrilor imuni la aceasta specie.

Iepurii sunt totodata o specie de electie pentru testa­rile cele mai diverse in laborator. In masura in care sistemul imun este in stransa legatura cu sistemele nervos si endocrin este si in acest caz esentiala cunoasterea parametrilor imunologici normali si modul in care factorii externi ii influenteaza.

In acest experiment s-a urmarit modul in care testul de inglobare a particulelor de carbon 'in vitro' este util pentru definirea activitatii fagocitare la iepure,caracterizarea indivi­duala si in grup a acestei activitati ca si modul in care se pot defini,pornind de la valorile experimentale,niste relatii matema­tice caracteristice dreptelor de regresie ce definesc fagocitoza.

1. Material si metoda

Testarile au fost efectuate pe cinci probe de sange integral provenind de la iepuri adulti, masculi din rasa Supercuniram. Iepurii au fost mentinuti in baterii individuale furajati si adapati ad libidum .

Sangele s-a recoltat in cantitate de 4 ml prin punctia sinusului orbitar cu ajutorul unor capilare de sticla heparinate in tuburi de sticla sterile pentru a nu influenta functia fagocitara prin introducerea in experiment a unor germeni banali din mediu.

Dupa recoltare sangele a fost prelucrat in modul aratat in capitolul I.

Citirile s-au facut la 10, 20, 35 si 45 minute iar valo­rile citite au fost exprimate in unitati de densitate optica.

Pornind de la valorile experimentale s-au calculat parametrii statistici (X, S, S² ) si semnificatia diferentelor intre acest lot si celelalte loturi studiate. S-au calculat de asemenea coeficientii dreptelor de regresie care definesc functia fagoci-tara si coeficientii de corelatie intre densitatea optica (inten­sitatea fagocitozei) si timpul de incubare.

Rezultate.

Tabelul 3 prezinta rezultatele individuale obtinute la iepuri.

La 10 minute de incubare valorile sunt cuprinse intre 0,550 UDo si 0,990 UD0; la 25 minute intre 0,545 UDo si 0,990 UDo; la 35 minute intre 0,490 si 0,950 UDo iar la 45 minute intre 0,475 si 0,940 UDo. Mediile corespondente sunt de : 0,739; 0,748; 0,708 si 0,690 UDo respectiv.

Semnificatia diferentelor intre loturile de bovine si iepuri respectiv este asigurata statistic la diferite nivele (p < 0,05 - p < 0,01), iar cele dintre loturile de iepuri si ovine nu beneficiaza de asigurare statistica.

Urmarind valorile individuale in dinamica (fig.3) se constata o scadere lenta a densitatilor optice la toate probele comparativ cu celelalte specii. Dreptele teoretice sunt prezentate in fig.

Coeficientul de corelatie pentru aceasta specie, descriind dependenta densitatilor optice de timp este r=-0,920 foarte semnificativ statistic (p < 0,01).

Date statistice in testul de fagocitoza la iepuri

S² = 0,03	10´	S² = 0,0325	20´
S = 0173		S = 0,180
X = 0,799		X = 0,748
S² = 0,031	35´	S² = 0,032	45´
S = 0,177		S = 0,179
X = 0,708		X = 0,69

Testul t

Bovine - Iepuri  Iepuri - Ovine

15´t = 2,59 p < 0,05 20´ t = 0,44 nesemnificativ

20´t = 3,25 p < 0,01  35't = 0,73 nesemnificativ

35't = 3,53 p < 0,01  45´t = 0,94 nesemnificativ

45´t = 3,58 p <0,01

3.Discutii

Rezultatele obtinute in acest experiment vin sa subli­nieze utilitatea testului de fagocitoza in definirea activitatii fagocitare la iepuri. Se observa ca intr-un context general de activitate scazuta la aceasta specie la unii indivizi inglobarea particulelor de carbon este minima variatiile de densitate optica nedepasind 0,050 de unitati de densitate optica. Pentru o mai bu­na caracterizare a activitatii fagocitare la aceasta categorie de varsta, rasa si sex, cercetarile trebuie extinse. Se pot sesiza totusi diferente, in cazul unor timpi de expunere chiar semnifi­cative statistic la diferite nivele ceea ce indica prezenta unor diferente intre specii, sesizabile prin acest test.

Definirea coeficientilor dreptelor de regresie pentru aceasta specie permite interpretarea valorilor practice obtinute dar totodata si estimarea evolutiei activitatii fagocitare inter­mediare intre doua citiri.

CONCLUZII

1. Testul de inglobare al particulelor de carbon ca tehnica pentru estimarea fagocitozei la cele trei specii inves­tigate si-a dovedit utilitatea, oferind posibilitatea urmaririi in dinamica a activitatii cumulate micro- si macrofagice indi­viduale. Datele obtinute prin acest test sunt reproductibile si pot servi pentru calcularea coeficientilor unor functii care definesc fagocitoza.

Prin efectuarea testului cu particule de carbon la bovine s-a stabilit o corelatie nesemnificativa statistic intre densitatea optica si timpul de incubare (r=-0,390) si s-a defi­nit functia corespondenta:

y= -95,28x  + 66,10

3. Activitatea fagocitara la ovine s-a dovedit a fi de mai mica intensitate decat la bovine. Corelatia intre valorile obtinute, a caror variatie este mai uniforma decat la bovine, a fost negativa, dar foarte semnificativa statistic:

r=-0,934  , y=-205,14x+170,42

In cazul lotului de iepuri,functia fagocitara pare sa fie mult incetinita. Testul utilizat permite relevarea diferen­telor dintre indivizi si specii. Semnificatia statistica a diferentelor este asigurata doar intre lotul de iepuri si cel de bovine. Intre loturile de iepuri si ovine nu sunt diferente semni­ficative.

Functia definita in acest caz a fost:

Y= -530,29x + 409,97

(r= -0,920,  pc 0,001)

BIBLIOGRAFIE

Baarsma G.S., LaHey,E., Glasius E., DeVries, J., Kijlstra A. - Am J. of Opt., -1987, 104, 3, 211-217;

Benda V., MADR P. - Assessement of lymphocyte and Phagocytic Function in Goats treared with Glucon, -1991, J.Vet.Med.B 38, 681-684;

Borst, C.H.A., Counotte, G.H.N. - Vet.Res.Communications, 10, -1986, 143-148;

Drutz .J.,Graybill J.R. -Immunity and Infection, Basic & Clinical & aiinology, Lange Medical Publications, 1983, 209-232;

Hara A., Kusakari J., Kawamoto K.,Hara S.-Acta Otolaryngologica (Stoch.), 1987, Suppl 435, 130-135;

Jemskov V.M Dastijenia v issledovanii fiziologii i metabolixme fagotitov, 1985, J. Microbiol. Epidemial i Immunobial, Moskva, 12,

Lechowski, R.-Med.Weteryn., 39,5,1983,5,281

Lechowski, R.-Med.Weteryn, 39,6,1983 : 314

Moore, P.F Vet.Pathol., 23:763-769, 1986;

10. Okutomi T., Satdr M., 0shima H., Yamazaki M.-Antigens Associated with Varions Cytotoxic Activities of Murine Peripheral Macrophages, 1986, Microbial, Immunol., vol 30 (10) 1037-1047;

Patapova T.V. Spolianski J.V., Nisanbaev K.N.-Veterinarija,

Rainer,H. Lysozym und Immunglobulinbestimmungen in Tracheo-bronchialsekret von Pferden mit cronishe obstructiver Bron-chiolotis, teza de doctorat, Hanovra, 1984;

13.Saragea M - Tratat de fiziopatologie, vol II, Ed.Acad.Romana, 1987.