Densitatea electronica a structurii proteinei

Densitatea electronica a structurii proteinei

Densitatea electronica a structurii proteinei poate fi obtinuta din inversa transformatei Fourier a imaginii de difractie

In microscopie, inversa transformatei Fourier este facuta de catre lentile

Nu exista microscop de raze X cu rezolutie si sensibilitate suficienta

Oglinzile de raze nu au rezolutiei suficienta pentru o singura proteina.

Puterea radiatiei ar trebui sa fie prea mare iar proteina ar fi ..denaturata

Procedeu general:

Se inregistreaza imaginea de difractie a cristalului proteic

Se calculeaza inversa transformatei Fourier

Dezavantaj: se pierde informatia de faza

Problema fazelor

Metode prin care se incearca cunoasterea fazelor

Cea mai folosita metoda: inlocuirea cu atomi grei

Un specific al difractiei pe cristale macroscopice: nu se obtine o image continua ci spoturi de difractie

Celula unitara: cea mai mica unitate din care se poate genera cristalul doar prin translatii

Pentru un cristal proteic celula unitara este formata din una sau mai multe molecule

Parametri importanti:

Concentratia proteinei

Tipurile de sare si concentratia lor

pH

Tipul si concentratia surfactantilor

Temperatura

Viteza de cristalizare